- 品牌:
WAKO - 规格:
10tests - 供应商:
上海甄准生物 - 数量:
少量现货
microRNA Isolation Kit——分离miRNA或靶mRNA的新工具 近年来,microRNA(miRNA)成为生命科学和医学领域的明星。虽然只有22个左右的碱基,但是在基因表达调控中起着至关重要的作用,参与细胞分化、个体发育,且与多种疾病相关。因此对于miRNA的研究越来越多。传统的miRNA分离方法是结合了基于酚/胍的样品裂解和硅胶膜离心柱,直接将总RNA分离出来,不能直接分离出miRNA。 Wako的miRNA纯化试剂盒能够制备高纯度的miRNA片段,在细胞中,成熟的miRNA分子可与Argonaute(Ago)蛋白家族形成RNA沉默复合体(RISC),此纯化试剂盒利用免疫沉淀方法,与Ago蛋白结合抗体的特异性,分离miRNA。纯化的miRNA片段含有非常少的rRNA和tRNA降解片段。与传统的miRNA纯化方法相比,有效提高了miRNA的克隆效率。纯化的miRNA可用于分析miRNA的靶mRNA。 n 特点 1) 内源性Ago蛋白的免疫沉淀 2) 高度纯化与Ago蛋白结合的miRNA 3) 其他RNAs的污染少,比如rRNA & tRNA 4) 纯化的microRNA片段可用于高效的microRNA克隆和微阵列 5) 可同时分离miRNA和靶mRNA,便于直接进行后续的靶mRNA的克隆和定量分析
与常规方法比较 | 常规方法 | Wako的新方法 | 总RNA提取 | 需要 | 不需要 | 小RNA (≦200nt)的纯化 | 变性PAGE电泳 | 从变性PAGE凝胶中进行凝胶抽提 | 从变性PAGE胶中进行凝胶纯化 | rRNA片段污染率 | 高 | 低 | tRNA片段污染率 | 高 | 低 | 操作时间 | ≦12小时 | ≦4小时 | 使用例1: 图1:使用,Human Ago2纯化microRNA片段 从培养的人类细胞系(HeLa,HepG2,HEK293)中纯化的microRNA片段用Urea-PAGE和银染方法(Wako Cat. No. 311-03961;CLEAR STAIN Ag)检测。每个细胞系的数目大约是5×106。上样量是用该试剂盒纯化后获得的5ul microRNA溶液(制备的溶液一般是10ul)。
siRNA药理研究 将小分子干扰RNA(siRNA)直接注入细胞中,这些siRNA结合蛋白元件,也可形成RISC,此试剂盒也可纯化与Ago2结合的siRNA,便于后续的siRNA研究分析。因此此试剂盒不仅能分离miRNA,亦可作用于siRNA,大大拓宽了试剂盒的使用范围。 后续研究: 1)RNAi的抑制效果 2)siRNA的药代过程 3)体内siRNA的稳定性 4)毒性/副作用 5)对于非特异性mRNAs的脱靶效应
货号 品名 规格 291-70201, Human/Mouse Ago1 10tests 292-66701 , Human Ago2 10tests 292-67301 , Mouse Ago2 10tests 297-70301 , Human Ago3 10tests 290-66501 microRNA Cloning Kit 8tests 298-65103 Single Strand DNA Ligase, Thermostable, recombinant, Solution 200units 292-65101 Single Strand DNA Ligase, Thermostable, recombinant, Solution 500units 298-67901 PCR Purification Kit 30tests 298-68001 Target mRNA Cloning Kit 10tests更多产品,更多优惠!请! 上海甄准生物科技有限公司 |
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